跳转至

基础技术

细胞生物学实验技术

显微镜技术

分辨率和放大倍数是显微镜的两个重要指标。

光学显微镜

以可见光为光源,最小分辨距离是 0.2µm。

标本不必彻底脱水。

相差显微镜

用于观察活细胞、未染色组织切片或缺少反差的染色标本。

荧光显微镜

对经紫外线照射后可发荧光或用荧光染料或荧光抗体染色后经紫外线照射后可发荧光的物质进行定性和定量研究的工具之一。

电子显微镜

以电子束为光源,最小分辨距离是 0.2nm。

小于 0.2µm 的细微结构称为亚纤维结构或超微结构。

标本要彻底脱水。

样品要在真空下观察。

透射电子显微镜(TEM)

由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜观察的标本需用切片机制成超薄切片。

平面图像。

扫描电子显微镜(SEM)

用来观察标本的表面结构。

三维图像。

生物化学与分子生物学技术

细胞化学技术

固定、显色技术等。

免疫细胞化学

根据免疫学原理,利用抗体与特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。

显微光谱分析技术

根据细胞中很多成分都具有特定的吸收光谱这一特性,利用显微分光光度计对某些成分进行定位、定型、甚至定量测定。

放射自显影技术

离心技术

差速离心和密度梯度离心

差速离心

在密度均一的介质中由低俗到高速逐级离心,利用不同离心速度所产生的不同离心里来分离不同大小的细胞和细胞起。

密度梯度离心

用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或云奖置于介质的顶部,通过重力或离心立场的作用使不同密度的颗粒分别集中于某一密度带中,进而使细胞分层、分离。

沉降系数

$$S = \frac{dx / dt}{w^2 x}$$

其中,$x$ 为颗粒到转头中心的距离,$w$ 是角速度,$t$ 是时间,$dx/dt$ 为沉降速度。

$1 \times 10^{-13}s$ 为一个沉降系数单位,称为 $1S$。

细胞电泳

在一定 pH 下细胞表面带有净的正或负电荷,能在外加电场的作用下发生泳动,这种现象称为细胞电泳。